主题曲，也称主题歌， 是在电影、电视剧、动画、话剧等作品中，用来代表作品的主要乐曲或歌曲。这类歌曲相对其他歌曲具有一定的代表性，不过并非所有主题曲都会在相应的作品中播放，某些电影可能会将主题曲放置在电影结束后的字幕清单中。
主题曲在不同国家上演、播放时，有时会由于不同的风俗民情等因素，会另请填词人以本土语言重新填写歌词，并会另请歌手、配音员或其他人士代唱。例如，在欧美地区，几乎都会把歌曲与歌词重新改写，影像则是会和原作品有部分差异。台湾、香港动画歌曲中，亦有部分歌曲有改唱（使用原曲，以本地语言填词和主唱）。
一般而言，主题曲是指片头曲；但有时主题曲是另外一首，而非片头曲；而且有时片尾曲（或插曲）也被视为主题曲。在电视剧、动画里通常会再区分为片头曲和片尾曲，电视剧的歌曲有些是专门为该剧创作，歌词内容与剧情紧密联系。动画方面，有些动画歌曲是动画公司自行原创，有些则是利用歌手既有歌曲，加以剪裁后，再加上电视剧或动画画面。
主题曲在作品中起着特殊作用，能够突出影片的抒情性、戏剧性和气氛，并且已经成为一种新的现代音乐体裁。优秀的主题曲还能起到宣传电影的作用。