绘制标准曲线通常遵循以下步骤:
准备数据
确定需要绘制的标准曲线类型,例如光密度-浓度标准曲线。
选择合适的标准液浓度,通常包括待测样品的可能变异范围,可选择5种浓度。
配制标准液
使用容量瓶准确配制不同浓度的标准液。
确保浓度差距成倍增加或等级增加,并保证显色条件与待测样品相同。
测量吸光度
使用紫外可见分光光度计进行测量。
控制变量,例如同体积不同浓度或同浓度不同体积。
进行空白对照,确保吸光度为0。
绘制标准曲线
在图纸上绘制散点图,横轴为浓度,纵轴为吸光度。
将各点连线,理想情况下曲线应通过原点,符合Lambert-Beer定律。
如果点不在一直线上,尽量使直线通过更多点,使不在直线上的点均匀分布。
数据处理
在Excel中输入数据,选择散点图进行绘制。
添加趋势线,并显示公式和R方值。
确保R方值(决定系数)接近1,表示拟合度良好。
验证标准曲线
进行多次平行测定,确保重复性良好。
当条件有变化时(如更换仪器、移动位置、调换试剂或室温变化),需重新绘制标准曲线。
记录和报告
在坐标纸上或Excel中注明实验项目的名称、使用的仪器型号、滤光片号码或单色光波长、绘制日期和室温。
得到拟合曲线的方程,并用于后续样品测定。
请根据具体情况调整上述步骤,并确保实验操作符合实验室安全规范