米氏常数（Km）是 酶促反应达最大速度（Vm）一半时的底物（S）的浓度。它是酶的一个特征性物理量，其大小与酶的性质密切相关。米氏常数被广泛应用于生物化学、分子生物学、基因工程、生物制药、临床用药等领域的理论、实验和实践中。
在酶促反应中，当底物浓度较低时，反应速率与底物浓度成正比，表现为一级反应；当底物浓度达到中等水平时，反应速率与底物浓度的乘积成正比，表现为混合级反应；当底物浓度继续增加时，反应速率与底物浓度的倒数成正比，表现为零级反应。米氏常数可以帮助我们了解酶与底物的亲和力，Km值越小，表示酶对底物的亲和力越高，需要较低的底物浓度就能达到最大反应速率的一半；反之，Km值越大，表示酶对底物的亲和力越低。
米氏常数可以通过双倒数作图（Lineweaver-Burk plot）来测定，该作图方法通过将酶促反应速度的倒数（1/V）对底物浓度的倒数（1/S）作图，可以得到一条直线，其斜率即为米氏常数（Km），截距为最大反应速度的倒数（1/Vmax）。
总之，米氏常数是酶动力学研究中的一个重要参数，它可以帮助我们更好地理解酶与底物之间的相互作用，以及酶促反应的特性。