糖异生与糖酵解代谢途径的主要差异包括：
反应位置
糖酵解：主要发生在细胞质中。
糖异生：主要在线粒体和细胞质中进行，但某些步骤如丙酮酸羧化酶反应发生在线粒体基质中，葡萄糖-6-磷酸酶反应发生在内质网膜上。
反应过程
糖酵解：葡萄糖分解为丙酮酸，产生ATP、NADH和2个丙酮酸，此过程包含三个不可逆反应。
糖异生：丙酮酸转化为葡萄糖，涉及糖酵解的逆过程，但并非完全逆反应，因为糖异生途径中有些步骤使用不同的酶。
能量消耗
糖酵解：净产生2个ATP。
糖异生：消耗6个ATP（其中两个为GTP），因为糖异生过程中需要额外的能量投入来驱动反应的进行。
参与反应的物质
糖酵解：从葡萄糖到PEP的过程中，中间产物相同，但糖异生中某些步骤使用的酶与糖酵解不同。
限速步骤
糖酵解：限速步骤是ATP的生成，即第一步反应。
糖异生：限速步骤是第一步反应，即丙酮酸转化为PEP的过程，这需要使用丙酮酸羧化酶。
生理功能
糖酵解：主要发生在细胞无氧环境下，用于分解葡萄糖获得能量。
糖异生：主要发生在肝脏中，用于回收多余的丙酮酸或乳酸，并生成糖类物质。
这些差异体现了糖异生和糖酵解在细胞代谢中的不同角色和调控机制